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兔單克隆抗體在橫紋肌溶解相關急性腎損傷中的潛在應用

發(fā)表時間:2023-10-10 訪問次數:451

肌紅蛋白(Mb)是一種微小的單體蛋白,其重量僅為17.8kDa,主要在脊椎動物的心臟和骨骼肌中表達。它具有結合、儲存和運輸氧到線粒體的關鍵作用。之前的研究已經發(fā)現,在心肌中,每克組織濕重中的Mb含量大約為2.5mg,而在骨骼肌中這個數值約為4.0mg。

 

Mb由珠蛋白(α-珠蛋白鏈和β-珠蛋白鏈)和血紅素基團共同組成,它通常存在于脊椎動物的橫紋肌和心肌中。然而,如果大量的Mb出現在血液、尿液或腎臟等器官中,這將是非常危險的,因為它可能引發(fā)一種可能危及生命的綜合征——橫紋肌溶解癥(RM)綜合征。橫紋肌溶解癥(RM)是骨骼肌受損和細胞內分解產物(主要包括Mb)釋放到血液循環(huán)中。 橫紋肌溶解的誘因多種多樣,包括擠壓傷、創(chuàng)傷、某些感染、藥物、酒精和毒素。在這些因素中,Mb起著關鍵的作用,是橫紋肌溶解病理生理學的重要組成部分。Mb是骨骼肌的主要成分,但當它釋放到血液中時,可能會引發(fā)急性腎損傷(AKI),這是嚴重橫紋肌溶解的危險并發(fā)癥。

 

目前的研究已經明確,Mb通過三種機制引起急性腎損傷(AKI):第一種機制是腎小管堵塞,這是由Mb的毒性所導致的;其次,氧化損傷是由Mb中的鐵解離和自由基的釋放引起的;最后一種機制是由于Mb引起的脂質過氧化。

 

在診斷和基礎研究中,抗體發(fā)揮著重要的作用。對于心肌梗死或橫紋肌溶解的檢測,Mb的實驗室檢查是最為重要在的患一這項發(fā)生指標。在實驗動物的基礎研究中,RM-AKI或擠壓綜合征-AKI(CS-AKI)仍然是是腎損傷的關鍵生物標志物。

 

Mb的抗體檢測取決于抗體的特異性和親和力,單克隆抗體正是針對具有高純度和強特異性優(yōu)勢的特定表位進行研發(fā)的。它已被廣泛應用于各種生物醫(yī)學科學領域,并促進了許多學科的發(fā)展。特別是重組兔單克隆抗體,它具有諸多優(yōu)勢,包括更好的特異性和靈敏度、高批次間一致性和可重復性、無動物源性制劑、長期供應安全,以及由于更大的兔免疫庫,對不同靶標具有更廣泛的免疫反應性。目前已經有針對人Mb的重組兔單克隆抗體成功制備并商業(yè)化,用于實驗室室研究。不幸的是,迄今為止,尚未報道用于大鼠Mb免疫原的重組兔抗Mb單克隆抗體具有高親和力、廣泛的物種反應性和多方面的應用。

 

為此,研究人員通過外源性大鼠Mb基因真核表達、動物免疫、雜交瘤篩選、重鏈和輕鏈基因測序及瞬時轉染質量比優(yōu)化、重組抗體表達純化等技術制備的新型重組兔抗大鼠Mb單克隆抗體。具有極高親和力(KD= 1.21 pM),廣泛的物種反應性(小鼠,大鼠,人和馬)和良好的組織特異性(骨骼肌和心?。?。應用重組兔抗Mb單克隆抗體通過蛋白質印跡(WB),免疫組織化學和免疫熒光診斷RM-AKI疾病的腎臟,心肌,骨骼肌組織和血液中的Mb沉積。這項研究揭示了新型單克隆抗體在RM相關疾病的潛在應用。

 

雜交瘤技術是抗體發(fā)現主要途徑之一,在科研抗體開發(fā)和抗體藥物發(fā)現中都扮演著重要角色。雜交瘤細胞既能無限增殖又能產生特異性抗體,可用來制備高純度、污染少、可重復的單克隆抗體。普健生物作為武漢國家生物產業(yè)基地指定的光谷抗體發(fā)現與篩選公共服務平臺,提供優(yōu)質的雜交瘤細胞開發(fā)服務,提供多種抗原免疫方式,經融合、篩選、檢測,最終得到高質量的雜交瘤細胞。

 

服務優(yōu)勢

1. 免疫抗原類別:多肽、重組蛋白(五大表達系統(tǒng))、小分子和 DNA 免疫等多種方案

2. 一站式服務:提供從基因序列到雜交瘤細胞開發(fā)及鑒定的整體解決方案

3. 成功率高:單抗項目 2000+,成功率高達 95.4%

4. 個性化定制:提供 IHC/IF/FC 等應用級別抗體開發(fā)服務

5. 完善的抗體質量評價體系:WB/IHC/IF/FC 等多種檢測方式

6. 專業(yè)技術團隊:法國首席科學家?guī)ш牐嗄昕贵w研發(fā)經驗

7. 下游對接服務 : 雜交瘤細胞測序,抗體人源化,重組抗體表達,化學發(fā)光應用抗體對篩選及大規(guī)??贵w生產等服務

案例展示

 

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