單克隆抗體制備是一項(xiàng)精細(xì)且復(fù)雜的工作，需要通過一系列的手段才能實(shí)現(xiàn)抗體的制備。而且隨著技術(shù)的不斷發(fā)展，單克隆抗體從雜交瘤技術(shù)發(fā)展到現(xiàn)階段使用最為廣泛的單B細(xì)胞技術(shù)。

　　單B細(xì)胞技術(shù)其實(shí)就是通過分離單個B細(xì)胞，通過對其進(jìn)行克隆培養(yǎng)，結(jié)合多種PCR技術(shù)形成的一種體外篩選及表達(dá)體系。使用單B細(xì)胞技術(shù)制備的單克隆抗體具有高通量、高效率、低細(xì)胞數(shù)等優(yōu)點(diǎn)，是現(xiàn)如今最近、最高效的抗體篩選方法之一。

　　單B細(xì)胞技術(shù)制備流程：

　　1、鑒定和分離單個B細(xì)胞

　　單B細(xì)胞分離通常有兩種：隨機(jī)分離和抗原特異性分離。通過多次免疫兔子，檢驗(yàn)血清中抗體含量及質(zhì)量，而后從中分離出B細(xì)胞;

　　2、擴(kuò)增和克隆抗體基因

　　進(jìn)行細(xì)胞分選時(shí)，需要將B細(xì)胞注入到合適的培養(yǎng)液中，然后對其進(jìn)行RNA提取并進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄;

　　3、重組抗體表達(dá)

　　對所得DNA進(jìn)行目的基因表達(dá)，獲得相應(yīng)的目標(biāo)抗體;

　　4、抗體鑒定

　　將所得抗體進(jìn)行純化(可采用親和層析法或離子交換層析法進(jìn)行純化)，而后對抗體的特異性和生物活性進(jìn)行鑒定;

　　5、大規(guī)模生產(chǎn)

　　測定所得目的抗體特異性和生物活性達(dá)到我們要求后，開始進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn);

　　單B細(xì)胞技術(shù)制備的單克隆抗體的優(yōu)勢：

　　1、高特異性。和其他動物相比，兔免疫系統(tǒng)更加優(yōu)秀，所得抗體特異性更強(qiáng);

　　2、高穩(wěn)定性。兔單克隆抗體穩(wěn)定性更高;

　　3、高親和力。兔B細(xì)胞的親和力是其他動物的10-100倍;

　　當(dāng)然了，單B細(xì)胞兔單克隆抗體制備技術(shù)雖然具備著其他抗體表達(dá)系統(tǒng)所不具備的優(yōu)勢，但是，它需要的技術(shù)水平更高，相關(guān)制備成本也更高一些。總的來說，只有具備相應(yīng)技術(shù)實(shí)力的公司才能采用單B細(xì)胞技術(shù)制備抗體。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供兔單克隆抗體制備服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來電咨詢。